Brzi test na adenovirus-izlučivanje iz nosa

Namjeravanu upotrebu:

SARS-CoV-2 Komplet za testiranje nukleinske kiseline primjenjuje se za kvalitativnu detekciju nukleinske kiseline COVID-19 u brisevima nazofarinksa, orofaringealnih briseva i sputuma. Rezultati testa pružaju osnovu za molekularnu dijagnozu za infekciju ili sumnjive pacijente i ne bi se trebali koristiti kao jedini kriterij za kliničku dijagnozu.

Materijali:

Procedura testiranja:

A. Priprema uzorka

Ekstrahirana RNK je početni materijal za SARS-CoV-2 komplet za testiranje nukleinske kiseline.

Važno: Svaki postupak ekstrakcije nukleinske kiseline mora se izvoditi istovremeno s jednom pozitivnom kontrolom (40 μL, razrijediti sterilnim fiziološkim rastvorima/PBS do željene zapremine) i jednom negativnom kontrolom (40 μL, razblažiti sterilnim slanim rastvorima/PBS do željene zapremine).

Preporučuje se korištenje sljedećih komercijalnih kompleta za ekstrakciju nukleinskih kiselina: PureLinkTM Mini Kit za virusnu RNA/DNK (Invitrogen); Mini kit virusne RNA (QIAGEN); TIANamp Hi-DNA/RNA komplet (TIANGEN);

B. Postavljanje Reaction Mixa

1. Sve reagense i uzorke treba potpuno odmrznuti, u potpunosti izmiješati i kratko centrifugirati na sobnoj temperaturi (približno 18 do 25 stepeni) prije upotrebe.

2. Pripremite potrebnu zapreminu reakcione mešavine u polipropilenskoj mikrocentrifugalnoj cevi odgovarajuće veličine.

3. Odpipetirajte 25 µL Reaction Mixa u svaku potrebnu jažicu odgovarajuće optičke 96-reakcione ploče ili odgovarajuće optičke reakcione cijevi.

C. Dodavanje šablona

1. Dodajte 5 μL ekstrahirane RNK iz uzoraka/pozitivne kontrole/negativne kontrole. Ukupna zapremina je 30 μL.

2. Temeljno pomiješajte uzorke i kontrole sa Reaction Mixom pipetiranjem gore i dolje/Vortex.

3. Zatvorite reakcionu ploču 96-reakcione ploče odgovarajućim poklopcima ili optičkim lepljivim filmom i reakcione epruvete odgovarajućim poklopcima.

4. Centrifugirajte 96-reakcionu ploču u centrifugi sa rotorom mikrotitarske ploče 30 sekundi pri približno 2500 o/min.

D. Programiranje PCR instrumenta u realnom vremenu

Za osnovne informacije u vezi sa podešavanjem i programiranjem različitih PCR instrumenata u realnom vremenu, molimo pogledajte uputstvo za upotrebu odgovarajućeg instrumenta. Test je optimizovan za ABI7500 PCR sistem u realnom vremenu. PCR test se izvodi u uslovima ciklusa kao što je opisano u tabeli ispod.

Definirajte detektore fluorescencije

*Molimo postavite internu referencu fluorescencije instrumenta na "None", na primjer: Za instrumente serije ABI postavite "Passive Reference" na "None".

E. Analiza podataka

Podesite parametre analize i analizirajte podatke u skladu sa uputstvima za upotrebu relevantnih instrumenata.

Uzmimo ABI 7500 kao primjer:

Osnovna linija treba biti postavljena na raspon koji eliminira pozadinsku fluorescenciju pronađenu u ranim ciklusima pojačanja, ali koja ne preklapa područje gdje se signali pojačanja uzdižu iznad pozadine (početna vrijednost: 3~10; Krajnja vrijednost: {{2} }). Prag ciklusa (Ct) bi trebao biti u osnovi eksponencijalne faze. Kliknite na "Analiza" da automatski dobijete rezultat analize i pročitajte rezultat detekcije u prozoru "Izvještaj".

Popularni tagovi: adenovirus brzi test - nazalni sekrecija, Kina, dobavljači, proizvođači, fabrika, bulk